ارزیابی حساسیت بالقوه پوست

حساسیت به پوست (آلرژی) یکی از مهمترین نقاط نهایی برای ارزیابی در ارزیابی ایمنی قرار گرفتن در معرض پوست است. این یک واکنش بسیار پیچیده است که اغلب شامل سیستم های هومورال (خون) و لنفاوی (ایمنی) است. این می تواند غیر قابل پیش بینی باشد و ممکن است واکنش متقاطع با ارگان های دیگر مانند ریه یا دستگاه گوارش را نشان دهد. این شاید تنها واکنش نامطلوب آرایشی باشد که ممکن است به سرعت منجر به مرگ و میر شود. اگرچه نادر است ، اما آنافیلاکسی در محصولات مراقبت از پوست مطمئناً امکان پذیر است. این واقعیت که جمعیت غربی در بیان حساسیت رشد مداوم دارد ، بر اهمیت چنین ارزیابی می افزاید. انستیتوی ملی علوم بهداشتی ژاپن در سال 2014 گزارش داد که در سال 2009 موردی که در آن دو بیمار که نسبت به پروتئین گندم هیدرولیز شده (HWP) موجود در صابون صورت حساس شده بودند پس از مصرف آنافیلاکسی ناشی از ورزش وابسته به گندم (WDEIA) را تجربه کردند. محصولات گندم موسسه یادداشت می کند ، از سال 2009 ، بیش از 1900 بیمار با چنین آلرژی (از 20 ژوئن 2013) از موسسات مختلف در سراسر ژاپن گزارش شده اند. نکته مهم ، اکثر بیماران از همان صابون صورت (Cha no Shizuku) حاوی پروتئین گندم هیدرولیز شده با اسید (acid-HWP) استفاده کردند. اسید-HWP تجاری موجود در صابون صورت (Glupearl 19S) با وزن مولکولی متوسط ​​30-50 کیلو دالتون از گلوتن تولید شده است.

اگرچه ممکن است حساسیت از گندم تعجب آور نباشد ، اما گزارش جالب دیگری در ژاپن به مواردی از آنافیلاکسی به ترکیبی اشاره دارد که ممکن است به عنوان آنالوگ پلی اتیلن گلیکول غیر مضر شناخته شود. مقاله متفاوت از ترکیه واکنش آلرژیک شدید نوزاد به ادکلن را توصیف می کند. بعد از اینکه مادرش ادکلن به صورت او زد ، فرد دچار آنافیلاکسی شد. این نوزاد به عنوان یک کودک دو ماهه سالم توصیف شد و با ادم صورت و تنگی نفس در اورژانس بستری شد. وی با انواع داروها تحت درمان قرار گرفت و پس از عقب نشینی علائم مرخص شد.

سرانجام یک مورد جالب از آنافیلاکسی به ماده نگهدارنده 2-فنوکسی اتانول در اسپانیا در سال 2010 در خانمی 42 ساله که در معرض انواع محصولات آرایشی و بهداشتی قرار گرفته بر روی بدن و صورت بود ، در اسپانیا شرح داده شد. در یک حادثه ، هنگام استفاده از مرطوب کننده به دست و پاهای خود ، زن دچار کهیر فوری و به دنبال آن سرگیجه شد. یک آزمایش باز روی بازوی ولار مثبت بودن سریع فنوکسی اتانول نگهدارنده را تأیید کرد.

واکنش آلرژی پوست را می توان به طور کلی به عنوان فوری یا تاخیری طبقه بندی کرد. واکنش فوری شامل فعال شدن سلولهای ماست سل است که در درم قرار دارند. چنین فعال سازی را می توان از طریق آنتی بادی هایی ایجاد کرد که حداقل پس از یک بار مواجهه قبلی یا مستقیماً به سلول تولید می شوند. واکنش تأخیری شامل فعال شدن سلولهای T در سیستم لنفاوی است و همچنین توسط آنتی بادی ها واسطه می شود. واکنش حساسیت فوری همچنین “نوع 1” یا “کهیر” و واکنش تأخیری “نوع 4” نامیده می شود. آزمایش قرار گرفتن در معرض بالینی ، Repeat Insult Patch Test (RIPT) ، که به طور گسترده برای آزمایش مواد و فرمولاسیون استفاده می شود ، یک واکنش حساسیت فوری را ارزیابی نمی کند ، فقط نوع تاخیری را ارزیابی می کند. جدا از سنجش های اساسی انجام شده توسط چند روش دانشگاهی یا آزمایش بالینی پوست که شامل سوراخ شدن پوست با سوزن یا سنجاق حاوی مقدار کمی از آلرژن آزمایش شده است ، هیچگونه آزمایش تجاری برای واکنش نوع 1 و مواد آرایشی و فرمولاسیون به طور معمول برای چنین ارزیابی نمی شود.

در ارزیابی میزان آلرژی زایی بالقوه چند پیش شرط در نظر گرفته شده است. برای ایجاد چنین واکنشی ، ماده حساسیت زا باید در لایه کافی لایه شاخی نفوذ کرده و با پروتئین های حامل در پوست ارتباط برقرار کند. بنابراین ، واکنش فقط زمانی بروز می کند که قرار گرفتن در معرض مقادیر کافی همراه با ویژگی فرد باشد.

روش in vitro برای ارزیابی حساسیت پوستی نوع 4 به نام ARE-Nrf2 روش آزمایش لوسیفراز بر اساس مسیرهای عنصر پاسخ آنتی اکسیدانی / الکتروفیل Keap1-Nrf2 (ARE) است. این مسیرها در پاسخ محافظتی به استرس اکسیداتیو نقش دارند و همچنین شناخته شده اند که در فرآیندهای سلولی در حساس سازی پوست نقش دارند. این روش با استفاده از رده سلولی کراتینوسیت های انسانی جاودانه HaCaT که با یک پلاسمید انتخابی ترانسفکت شده اند ، برای تعیین مقدار القای ژن لوسیفراز به عنوان اندازه گیری مسیر ARE ، از این روش استفاده می کند. Keap-1 یک پروتئین حسگر است که حاوی سیستئین بسیار واکنشی است اما لیزین ندارد. عامل رونویسی Nrf2 (عامل هسته ای مربوط به اریتروئید 2 عامل 2) را هدف قرار می دهد. Nrf2 برای بیان حساسیت کامل و شرایطی برای ایجاد INF-γ ناشی از آلرژن ضروری است. از آنجا که مواد حساس کننده می توانند به لیزین یا سیستئین در واکنش پروتئین پوست واکنش نشان دهند ، توجه به این نکته مهم است که حساس کننده های بالقوه با واکنش انحصاری نسبت به لیزین ، مسیر Keap1 را القا نمی کنند و بنابراین با این روش شناسایی نخواهند شد. واسطه های درگیر در مسیر لیزین هنوز کشف نشده اند.

دستورالعمل های آزمون OECD شماره 442 D برای روش آزمایش ARE-Nrf2 لوسیفراز در 5 فوریه 2015 صادر شد. این روش بر اساس یافته هایی است که حساس کننده های پوست ممکن است بر روی پروتئین سنسور Keap 1 عمل کنند و از طریق پیوند کووالانسی ، ساختار آن را اصلاح کنند و در نتیجه تفکیک از فاکتور رونویسی Nrf2. Nrf2 جدا شده می تواند در فعال سازی ژن های وابسته به ARE پیش برود. یکی از مزایای این روش توانایی طبقه بندی مواد حساس کننده بالقوه در مقیاس از ضعیف به قوی است. نمونه هایی از حساس کننده های شناسایی شده توسط این روش عبارتند از: ضعیف: سینامیل الکل و آلدئید سینامیک ، متوسط: 2-مرکاپتو بنزوتیازول و قوی: متیل دی برومو گلوتارونیتریت.

روش نسبتاً ساده ، سریع و ارزان دیگری برای ارزیابی حساسیت بالقوه پوستی ، روش واکنش مستقیم پپتید (DPRA) است. این روش بر این اساس استوار است که به منظور ایجاد یک واکنش پاسخ ایمنی برای تولید آنتی بادی ها. ترکیب حساس کننده یا قسمت اساسی در مولکول که به عنوان حساس کننده شناخته می شود باید به یک حامل پروتئین متصل شود. این فرآیند haptenization نامیده می شود و به شیمی حساس سازی hapten گفته می شود. DPRA برای تقلید از پیوند کووالانسی مواد شیمیایی الکتروفیل (حساس کننده ها) به حوزه های هسته دوست در پروتئین های پوست طراحی شده است. این اجازه می دهد تا کمی از واکنش شیمیایی نسبت به مدل پپتیدهای مصنوعی حاوی سیستئین و لیزین. این روش شامل جوجه کشی از ترکیبات آزمایش شده با پپتیدهای مصنوعی حاوی سیستئین یا لیزین در غلظت منفرد در سه تکرار به مدت 24 ساعت است و نقطه نهایی ارزیابی شده توسط HPLC / UV انجام می شود تا درصد تخلیه سیستئین و لیزین نسبت به کنترل وسیله نقلیه تعیین شود. DRPA در 5 فوریه 2015 با عنوان OECD 442C منتشر شد.

این دو روش آزمایشگاهی بخشی از پیشنهادی برای مطالعات موجود است. مطالعات در مراحل مختلف ارزیابی و اعتبار سنجی است. مطالعات اضافی پیشنهادی بر اساس بیان ژن و فعال شدن سلول و همچنین آزادسازی سیتوکین است. ارزیابی درگیری سلولهای ماست سل در واکنش هنوز در باتری پیشنهادی وجود ندارد. جمعیت سلول های اصلی در درم که واسطه آلرژی و به ویژه واکنش فوری نوع 1 است. تا به امروز ، هیچ سنجشی وجود ندارد که بتواند همه سناریوهای احتمالی حساسیت پوستی را پیش بینی کند و هر سنجش محدودیت هایی دارد که باید درک و در نظر گرفته شود ، بنابراین در چنین ارزیابی باید یک باتری سنجش ایجاد و انجام شود. ردیف مطالعه انجام شده باید براساس ارزیابی خطر قرار گرفتن در معرض و سایر ویژگی های مرتبط با ترکیب آزمایش شده تنظیم شود. انجام در فعالیتهای فعالیت ساختار کمی سیلیکون (qSAR) برای تنظیم دقیق روش سنجش بسیار توصیه می شود.

نویسنده می خواهد از Cyprusotex Discovery Ltd (www.cyprotex.com) برای ارائه برخی داده ها و همچنین تصویری که در ستون ظاهر می شود ، تشکر کند.

منابع
کوبایاشی T و همکاران Int J Dermatol. 54 (8): (2015) e302-5.
یاماسوجی Y و همکاران تماس با درماتیت 69 (3): (2013) 183-5.
Higashi Y و همکاران Allergol Immunopathol 40 (3) (2012) 198.
Arikan-Ayyildiz Z و همکاران J Investig Allergol Clin Immunol ؛ 21 (6): (2011) 494-5.
Núñez Orjales R et al J Allergol Clin Immunol Research. ؛ 20 (4): (2010) 354-355.
http://www.oecd-ilibrary.org/en Environment/test-no-442d-in-vitro-skin-sensitisation_9789264229822-fa
http://www.oecd.org/env/test-no-442c-in-chemico-skin-sensitisation-9789264229709-fa.htm
Natsch A. Tox Sci. 113 (2) (2010) 284-292.


نوا دایان

مالک
دکتر ناوا دایان LLC

Nava Dayan Ph.D. صاحب دکتر ناوا دایان LLC ، یک مشاوره علوم و تحقیقات پوست و ارائه خدمات به صنایع دارویی ، آرایشی و بهداشتی و مراقبت های شخصی است. او 25 سال تجربه در بخش مراقبت از پوست ، و بیش از 150 اعتبار انتشار دارد.
تلفن: 201-206-7341
ایمیل: [email protected]

Leave a reply

You may use these HTML tags and attributes: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <s> <strike> <strong>